El término HPLC procede de la palabra griega chroma- que significa color y -graphein que significa escribir. El primer uso registrado de la cromatografía en columna se le otorga al científico ruso Mikhail Tsvet que trituró carbonato de calcio en un tubo y posteriormente agregó hojas de una planta verde homogeneizadas, seguido de un solvente orgánico. Tsvet observó bandas de colores separadas a medida que el solvente pasaba a través del tubo. Así es como la cromatografía práctica comenzó al principio, separando con éxito varios pigmentos de las hojas.
En el mundo de hoy, hay muchos analitos que son incoloros y están separados por técnicas cromatografías, todavía se le conoce con el mismo nombre. Es un tipo de cromatografía en columna utilizada frecuentemente en bioquímica y química analítica. También se la denomina a veces cromatografía líquida de alta presión o cromatografía líquida de alta resolución, aunque esta terminología se considera antigua y está en desuso. El HPLC es una técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre las sustancias analizadas y la columna cromatográfica.
En la HPLC, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatografía en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria. A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos poli funcionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa. La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
Esta técnica está indicada para la separación de compuestos orgánicos semivólatiles. Hidrocarburos Poliaromáticos (PAHs), Aminoácidos: OTA, Ácido Fólico, Herbicidas, Vitaminas, Ácido tenuazonico, Formaldehído…etc. Rango de trabajo para muestras líquidas: µg L-1 - mg L-1 Rango de trabajo para muestras sólidas: µg Kg-1 - µg g-1
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La cromatografía líquida moderna es la técnica más versátil y ampliamente utilizada por los químicos e investigadores en los laboratorios de investigación, desarrollo y control de calidad, entre otras funciones, nos permite la separación, identificación cualitativa de especies en una variedad de materiales de carácter complejo, orgánicos, inorgánicos, biológicos y otros. El curso de HPLC pretende aportar conocimientos sobre temas avanzados teóricos y prácticos de la Cromatografía de Líquidos que sirvan para su posterior aplicación en los campos de la investigación, producción y servicios.
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